จากการแสดงให้เห็นว่าฮีโมโซอินสามารถก่อตัวขึ้นในระยะปรสิตของH. contortusเราประเมินว่าผลึกเหล่านี้สามารถก่อตัวขึ้นใน L4 ในหลอดทดลองได้หรือไม่ ตามที่คาดไว้ เม็ดสีที่คล้ายเฮโมโซอินถูกพบใน L4s ที่เลี้ยงโดยมีแพะ DFB ในขณะที่เม็ดสีเหล่านี้ไม่แสดงใน L4  พยาธิใบไม้ ที่ไม่มีอาหารเลี้ยงเชื้อ DFB (รูปที่  5 A, B) ในกลุ่ม L4 เดิมมีการระบุจุดสูงสุดในการดูดซึมที่เกี่ยวข้องกับฮีโมโซอิน 400 นาโนเมตร (รูปที่  5 C) เพื่อประเมินผลของเลือดต่อการตกผลึกของฮีม เราเพาะเลี้ยง L4 ในอาหารเลี้ยงเชื้อ DFB 12.5% ​​เป็นเวลา 24 ชั่วโมง 48 ชั่วโมง และ 72 ชั่วโมง และแสดงให้เห็นว่าการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 72 ชั่วโมงมีความเข้มข้นของฮีโมโซอินสูงกว่าเมื่อเทียบกับ 24 ชั่วโมงและ 48 ชั่วโมง (รูปที่  5ง). เมื่อเพาะเลี้ยง L4s ในอาหาร RBC ที่มีความเข้มข้นเกรเดียนต์ การผลิตเฮโมโซอินขึ้นอยู่กับความเข้มข้น (รูปที่  5 E) ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าผลึกฮีมสามารถก่อตัวขึ้นใน L4s ในหลอดทดลอง ซึ่งอาจแสดงถึงเส้นทางการล้างพิษที่สำคัญ